Ashley 17 yaşındayken oyuncu olma hayaliyle Los Angeles’a taşınır. Ashley Greene aslında önce model olmak ister ancak boyunun defileler için yeterince uzun olmadığından oyunculuk dersleri almaya başlar ve oyuncu olmaya karar verir. Ardından Punk'd, Shark, Crossing Jordan gibi dizlerde konuk oyuncu olarak yeralır. Greene’in asıl çıkışı Stephenie Meyer romanı uyarlaması Twilight adlı filmle olur. Ashley bu filmdeki Alice adlı karakteri serinin diğer filmleri New Moon, Eclipse’de de (2010) oynayacaktır. Greene ayrıca, Otis, Radio Free Albemuth (2008), Summer’s Blood (2009), Skateland adlı filmlerde rol alır.